A etapa de extração é uma das maiores fontes de erros na determinação de vitaminas, já que estas são compostos freqüentemente lábeis e estão presentes em concentrações muito pequenas numa matriz orgânica complexa que são os alimentos. A extração desenvolvida por Catharino e Godoy para análise de ácido fólico em leites enriquecidos consiste em uma técnica rápida e bastante simples, sendo por esse motivo escolhida neste estudo para ser avaliada. A análise de superfície de resposta foi aplicada para investigar as alterações na concentração de ácido fólico em leite enriquecido frente a algumas modificações, especialmente, na etapa de extração. Foram avaliados quatro parâmetros: quantidade de amostra, tempo de extração, volume de ácido tricloroacético (TCA) e tempo de espera para injeção no equipamento. As condições preestabelecidas para análise de 1,0g amostra, 10 minutos no ultra-som, 350miL de ácido tricloroacético e injeção imediata são parâmetros que estão dentro da faixa teórica ótima, segundo os resultados obtidos pela análise da superfície de resposta, embora quantidades um pouco inferiores de amostra (0,9g) e maior volume de TCA (425miL) proporcionaram quantidades de ácido fólico ligeiramente superiores.

The extracting stage is one of the biggest origin of mistakes in determining vitamins, once those are frequently sensitive compounds and are found in small concentrations in a complex organic matrix, or in other words, foods. The extraction step developed by Catharino & Godoy to folic analysis in enriched milk consists of a very simple and quick technique, which is why it was chosen in this study to be evaluated. Response surface analysis was applied to investigation modification in concentration of folic acid in enriched milks with some changes, specially, in extraction step. Four parameters have been evaluated: sample quantity, time for extraction, volume of tricloroacetic acid (TCA) and waiting time for injection in the equipment. The pre-establish conditions for analysis of 1, 0g sample, 10 minutes in ultrasound, 350muL of tricloroacetic acid and immediate injection are parameters in a theoretical optimum average, according to the results obtained by response surface analysis, although inferior quantities of sample and larger volume of TCA (425muL) give a slightly superior quantity of folic acid.