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标题：PROTEÓMICA DE LA MADURACIÓN DE FRUTOS DE ZARZAMORA (Rubus sp.) CULTIVADOS EN MÉXICO, UNA PRIMERA APROXIMACIÓN
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作者：Ana Tztzqui Chávez-Bárcenas ; Cristina Alonso-Ojeda ; Pedro Antonio García-Saucedo 等
期刊名称：Ra Ximhai
印刷版ISSN：1665-0441
出版年度：2012
卷号：8
期号：3
页码：143-157
语种：Spanish
出版社：Universidad Autónoma Indígena de México
摘要：La producción de zarzamora en México ha aumentado 200 % en la última década. Las principales variedades utilizadas han sido introducidas y su establecimiento bajo las condiciones climáticas de México ha requerido de adaptaciones considerables al manejo agronómico observado en las regiones de origen de las mismas. El reto esencial del manejo de este producto se basa en las características intrínsecas de sus frutos suaves y su corta vida de anaquel, por lo que el conocimiento de su proceso de maduración bajo las condiciones de cultivo en México resulta indispensable para lograr manipular y mejorar la productividad y calidad de los frutos hasta su destino final. Con la intención de abordar en forma inicial esta problemática, se planteó como objetivo de este trabajo establecer las condiciones de protocolos de análisis de proteínas que permitan evaluar los componentes proteicos en frutos de zarzamora durante la maduración. Para lo cual se identificaron seis estadios de maduración de los frutos de la variedad comercial ‘Brazos’ (considerando desde frutos verdes y con bajo desarrollo, hasta frutos en madurez de consumo), se seleccionó un método de extracción de proteínas y se efectuó un perfil proteico por electroforesis en condiciones desnaturalizantes. Además, se establecieron los requerimientos para la electroforesis bidimensional (2-DE) de los extractos obtenidos, evaluando las condiciones de isoelectroenfoque y métodos de tinción. De acuerdo a los resultado obtenidos, se determinó utilizar 400 μg de proteína total en tiras de IPG de 7 cm con un intervalo de pH de 3 a 10, a un voltaje máximo de 50 000 V y tinción con azul de Coomassie. Utilizando el programa KODAK MI versión 4.5, se practicó un análisis preliminar de la distribución y abundancia de los péptidos expresados en los seis estadios de maduración, observando que el estadio 2 presentó el mayor número de puntos peptídicos (158), que el mayor porcentaje de puntos peptídicos en todos los estadios se presentaron en un intervalo de pH de 5.0 a 6.9 y peso molecular de 30 a 50 kDa. Se identificaron cuatro puntos de intensidad similar durante la maduración; sugiriendo su expresión constitutiva, tres de intensidad decreciente; que podrían estar involucrados en procesos iniciales del crecimiento del fruto, cuatro que se inducen durante maduración y seis de intensidad oscilante.
其他摘要：Blackberry production in Mexico has increased 200 % in the last decade. The main varieties used have been introduced from other countries, and its establishment under the climatic conditions of México has required considerable adaptations to the agronomic management observed in the regions of origin thereof. The essential challenge of managing this product is based on the intrinsic characteristics of its soft fruit and its short shelf life, so that knowledge of their maturation process under their growing conditions in Mexico is imperative to achieve and improve handling productivity and fruit quality unto its final destination. The aim of this work was to first address this problem by establishing the conditions of protocols for the analysis of proteins in blackberry fruits during different ripening stages. To accomplish this goal, six stages of fruit ripening were identified for the commercial variety 'Brazos' (considering a range of development from green, small fruits to fruits fully developed and in harvest maturity), a protein extraction was selected and a protein profile was performed by electrophoresis under denaturing conditions. In addition, requirements were established for two-dimensional electrophoresis (2-DE) of the extracts obtained by evaluating the conditions of isoelectric focusing and staining methods. According to the results obtained, it was determined to use 400 μg of total protein in IPG strips of 7 cm with a pH range of 3 to 10, using a maximum voltage of 50 000 V, and Coomassie blue staining. A preliminary analysis of the distribution and abundance of the peptides expressed in the six stages of maturation was performed using the KODAK MI software version 4.5, and the results showed that the stage 2 presented the highest number of peptide spots (158), the highest percentage of spots at all stages were observed in a pH range of 5.0 to 6.9 and molecular weight of 30 to 50 kDa. We identified four spots of similar intensity, suggesting its constitutive expression, three of decreasing expression; that could be involved in the initial processes of fruit growth, four spots of induced expression, and six of oscillating degrees of expression during ripening.
关键词：Proteínas; electroforesis desnaturalizante; electroforesis bidimensional;Proteins; denaturing electrophoresis; two-dimensional electrophoresis