文章基本信息

标题：OBTENCIÓN, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE IgG POLICLONAL DE CONEJO ANTI-LIPOPROTEÍNA (a) HUMANA
本地全文：下载
作者：Aidelian Jevey González ; Silvia María Hernández González ; Ángel Nápoles Vega 等
期刊名称：Archivo Médico de Camagüey
印刷版ISSN：1025-0255
电子版ISSN：1025-0255
出版年度：2005
卷号：9
期号：4
页码：1-9
语种：Spanish
出版社：Centro Provincial de Información de Ciencias Médicas de Camagüey
摘要：Las altas concentraciones séricas de Lp(a), una lipoproteína similar a la lipoproteína de baja densidad (LDL), se asocian a afecciones coronarias, cerebrovasculares y periféricas derivadas de la ateroesclerosis. A esta lipoproteína se le atribuyen propiedades trombogénicas y efectos inhibitorios sobre los mecanismos fibrinolíticos. Diferentes métodos han sido utilizados para la cuantificación sérica de la Lp(a), dentro de estos se destacan los métodos inmunoenzimáticos (ELISA). En este trabajo se describe el proceso de obtención, purificación y caracterización de uno de los reactivos biológicos necesarios para el montaje de un sistema inmunoenzimático ELISA que cuantifique Lp(a) en suero humano. Este reactivo es un suero policlonal hiperinmune como fuente de IgG policlonal de conejo anti-Lp(a) humana. Utilizando Lp(a) humana comercial, se inmunizaron dos conejos hembras según esquema de inmunización propuesto, se lograron títulos de anticuerpos anti-Lp(a) humana en los dos animales. Con la utilización de métodos no cromatográficos (precipitación por salado) y métodos cromatográficos (Gel filtración e intercambio iónico) se purificó la IgG policlonal de conejo anti-Lp(a) humana. A esta IgG purificada se le determinó el grado de pureza (SDS-PAGE) y la actividad biológica (inmunodifusión doble). La biomolécula purificada mostró el grado de pureza necesario para los fines en que será utilizada, así como reconoció el antígeno empleado en la inmunización.
其他摘要：High serum concentrations of Lp(a), a lipoprotein similar to LDL, are associated with coronary, cerebrovascular and peripheric affections derived from atherosclerosis. Thrombogenic properties and inhibilatory effects on fribinolytic mechanisms are attributed to this lipoprotein. Different methods have been used for serum quantification of Lp(a), among them, those immunoenzymatic (ELISA) are relevant. In this work, the process of obtainment, purification and characterization of one of the biologic reagents necessary for the mounting of an Immunoenzymatic System ELISA that quantifies Lp(a) in human serum is described. This reagent is a polyclonal hyperimmune serum as source of polyclonal IgG of rabbit human anti-Lp(a). Using commercial human Lp(a) two femenine rabbits were immunized according to immunization scheme proposed; tittles of human anti-Lp(a) antibodies in both animals were obtained. With the use of non-chromatographic methods (salt precipitation and ionic inter change) polyclonal IgG of rabbit human anti-Lp(a) was purified. To this purified IgG was determined the level of purity (SDS-PEGE) and biologic activity (double immunodiffusion. The purified biomolecule showed the level of purity necessary for the purposes in which it shout be used, it also recognizes the antigen used in the immunization.
关键词：IgG/ aislamiento/purificación; LIPOPROTEÍNA (a); INMUNIZACIÓN; SUEROS INMUNES; INMUNODIFUSIÓN; ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA;IgG/ isolation/purification; LIPOPROTEIN (a); INMUNIZATION; IMMUNE SEPA; IMMUNODIFFUSION; POLYACRYLAMIDE GEL ELECTROPHORESIS