O presente artigo teve como objetivo diagnosticar a percepção do clima organizacional sob a ótica dos funcionários e proprietários de uma empresa do agronegócio da Região da Grande Dourados, MS. O diferencial proposto na realização da pesquisa foi a aplicação da Matriz Importância-Desempenho de Slack (1993) para o diagnóstico do Clima Organizacional. Como referenciais teóricos foram utilizadas duas temáticas principais: conceitos e modelos para diagnóstico do Clima Organizacional e Matriz de Importância- Desempenho. Quanto ao método utilizado foi um estudo de caso. Considerou-se a percepção dos funcionários e proprietários sobre 15 fatores determinantes do clima organizacional. Os dados foram coletados por meio de questionário respondido pelos 14 funcionários e 2 proprietários da empresa. Os resultados indicam que a Matriz Importância-Desempenho pode ser uma ferramenta útil para análise quantitativa do Clima Organizacional, possibilitando a quantificação da importância e do desempenho dos fatores. Verificou-se que há discordância entre os funcionários e proprietários quanto à importância e o desempenho dos fatores promotores do clima organizacional. Foi possível identificar os fatores sobre as quais a empresa estudada deve agir prioritariamente para elevar o clima organizacional.