文章基本信息

标题：چهار مرحله تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي حاصل از بندناف به هپاتوسيت‌ها در داربست هيدروژلي
其他标题：Four Step Differentiation of Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stem Cells Within Hydrogel Scaffold Into Hepatocytes
本地全文：下载
作者：Saeed Azandeh ; Anneh Mohammad Gharravi ; Mahmoud Orazizadeh 等
期刊名称：Knowledge & Health Journal
印刷版ISSN：1735-577X
出版年度：2015
卷号：10
期号：4
页码：Page:65-71
DOI：10.22100/jkh.v10i4.908
语种：Persian
出版社：Shahroud University of Medical Sciences
摘要：مقدمه: باتوجه به افزايش تقاضا براي پيوند كبد و كمبود اهدا كنندگان عضو، توليد بافت كبد از طريق روش‌هاي مهندسي بافت كبد و كشت سه بعدي مورد بررسي قرار گرفته است. مطالعه حاضر با هدف جداسازی، استخراج و تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی بند ناف به هپاتوسیت‌ها و ارزیابی مارکرهای سلولي و بررسی رفتار و عملكرد آنها طراحی گردیدمواد و روش‌ها: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي از بندناف استخراج و جداسازي شده بررسی مارکرها و فنوتيپ سلول‌های بنیادی از طریق فلوسیتومتری انجام شد. سپس در طی یک دوره 14 روزه، سلول‌ها تحت چهار مرحله تمایز با عامل رشد فیبروبلاستی 4(FGF4)، عامل رشد هپاتوسیتی (HGF)، دگزامتازون (DEX)، انسولین-ترانسفرین-سلنیوم (ITS)، گلوکاگون (GLU) انکوستاتین(OSM) و تریکواستاتین (TSA) قرار گرفتند. به‌وسيله اليزا توليد اوره توسط سلول‌ها اندازه‌گيري شد. جهت بررسي بافت‌شناسی تمايز، مقاطع كشت سه بعدي تهيه شده، به‌وسيله روش هماتوکسیلین/ ائوزین رنگ‌آمیزی شد.نتايج: سلول‌هاي حاصل از ژله وارتون ماركرهاي سطحي مزانشيمي مانند CD73 را نشان داند اما اين سلول‌ها فاقد ماركرهاي سطحي سلول‌هاي خونساز مانند CD31 بودند. پس تمايز چند مرحله‌اي سه بعدي، مورفولوژي سلول‌ها گرد شده، در داربست آلژيناتي تجمعات سلولي به‌دليل نزديك شدن سلول‌ها ديده شد. مقادير اوره در هر دو كشت سه بعدي و دو بعدي به‌طور معني‌داري در الگوي وابسته به زمان افزايش يافت. مقادير اوره در كشت سه بعدي نسبت‌به كشت دو بعدي بيشتر بود (001/0P=). با بررسي بافت‌شناسی مقاطع دركشت سه بعدي بافتي پرسلول با دستجات و صفحات سلولي با هسته يوكروماتين ديده شد.نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه تمايز 4 مرحله‌اي سلول‌هاي بنيادي با استفاده از داربست هيدروژلي باعث ظهور ويژگي‌هاي عملكردي و مورفولوژيكي سلول‌هاي هپاتوسيتي مانند ترشح اوره و ايجاد صفحات سلولي شبه كبدي مي‌گردد.
其他摘要：Introduction: Due to increasing demand for liver tissue engineering, three-dimensional (3D) liver cells culture techniques have been proposed. Therefore, the aim of the present study was to examine the cells isolation and expansion of umbilical cord derived mesenchymal stem cells and in vitro 2D and 3D hepatocyte differentiation.Alsofunctional characteristics of hepatocytes were analyzedMethods: The study performed in several phases. In the first umbilical cord derived mesenchymal stem cells obtained and isolated, thereafter cellss expanded. Determination of Immunophenotype using Flow. Cytometry performed by DAKO – Galaxy Hepatic differentiation UC-MSCs was performed by four step sequential method using FGF-4, ITS, HGF, dexamethasone, glucagon, OSM and TSA. Urea production was quantified by ELISA.Section of tissue constructs stained with hematoxyllin and eosin for histological examinationResults: MSCs isolated from umbilical cord expressed mesenchymal surface antigen such as CD73, but were negative against CD31. Several cell clusters mainly between the round cells were observed in alginate scaffold after 3d differentiation. Urea production was increased time- dependable and was significantly higher in the experimental group of 3D culture (P=0.001). Tissue construct of 3D culture revealed multicellular tissue with several euchromatin cell plates.Conclusion: The finding of the present study indicated that four step differentiation of umbilical cord derived mesenchymal stem cells within hydrogel scaffold induced functionally and morphologically characteristics of hepatocytes such as urea production and cell plates.
关键词：بندناف، سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي، داربست، هيدروژل، تمايز
其他关键词：Umbilical cord; Mesenchymal stem cells; Scaffold; Hydrogel; Differentiation.