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  • 标题:マルチプレックスSNP(一塩基多型)分析を用いたマツ材線虫病抵抗性クロマツのクローン識別
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  • 作者:三樹 陽一郎 ; 白石 進
  • 期刊名称:日本森林学会誌
  • 印刷版ISSN:1349-8509
  • 电子版ISSN:1882-398X
  • 出版年度:2008
  • 卷号:90
  • 期号:2
  • 页码:111-115
  • DOI:10.4005/jjfs.90.111
  • 出版社:The Japanese Forest Society
  • 摘要:

    DNA塩基配列上の一塩基多型を利用したSNP(single nucleotide polymorphism)分析によるマツノザイセンチュウ抵抗性クロマツのクローン識別を試みた。まず,maritime pineのEST(expressed sequence tag)塩基配列情報を基に,本研究において新たに設計した2対のPCRプライマーで増幅される2 DNA領域について全16抵抗性クローンの塩基配列を決定した。その結果,これらのDNA領域中に合計20個のSNPが存在することが明らかとなった。このうちから16クローンすべてを識別するのに有効な9サイトを選定し,プライマー伸長法と蛍光法を組み合わせたSNPタイピングを行った。さらに,2対のPCRプライマーによるマルチプレックスPCRと9種類のSNPマーカーのマルチプレックスタイピングによる識別作業の効率化を行った。また,同一クローンで複数ラメートを使用し,再現性について検討したところ,常に安定したSNPタイプが得られ,信頼性のきわめて高いクローン管理が可能となった。

  • 关键词:クロマツ; クローン管理; クローン同定; SNP; マツ材線虫病抵抗性
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